Mastite bovina causada por Staphylococcus spp. resistentes à meticilina: revisão de literatura / Bovine mastitis caused by Staphylococcus spp. methicillin-resistant: literature review

Staphylococcus spp. são os micro-organismos mais relacionados a casos de mastite bovina. Algumas cepas destes micro-organismos têm apresentado fatores de virulência como genes de resistência a antimicrobianos com destaque para a resistência à meticilina que é um problema de saúde pública. Esta revisão de literatura tem o objetivo de compilar dados sobre a mastite bovina causada por Staphylococcus spp. resistente à meticilina (MRS). Apesar desse antimicrobiano não ser comumente utilizado no tratamento das mastites, a frequência de casos de infecção da glândula mamária causada por MRS tem variado entre 1,34 a 47,6%. Acredita-se que o contato dos humanos com animais positivos para MRS e vice-versa favoreça a transmissão deste patógeno entre as espécies, contribuindo para a variação nas taxas de infecção. A detecção de MRS pode ser realizada por meio de provas fenotípicas, moleculares ou sorológicas e as medidas de controle devem contemplar a identificação dos casos, segregação dos animais, estudo epidemiológico da fonte de infecção do rebanho, além da constante limpeza e higienização do ambiente de confinamento, equipamentos e utensílios de ordenha. Casos de mastite ocasionados por esse patógeno assumem relevância para a saúde pública, pois a ingestão de leite e/ou derivados contaminados podem desencadear a transferência de MRS para seres humanos. Com isso, é necessário um alerta constante quanto à vigilância epidemiológica em fazendas leiteiras.(AU)

The most related microorganism in cases of bovine mastitis are Staphylococcus spp. Some strains of these microorganisms have shown virulence factors like antibiotic resistance genes, such as the resistance to methicillin, which represents a public health problem. This literature review aims to compile data related to bovine mastitis caused by Staphylococcus spp. Methicillin-resistant (MRS). Despite this antimicrobial not be commonly used in the treatment of mastitis, the frequency of cases of infection of the mammary gland caused by MRS has ranged from 1.34 to 47.6%. It is believed that the contact of humans with animals positive for MRS and vice versa favors the transmission of this pathogen among species, contributing to the variation in infection rates. MRS detection can be performed by phenotypic tests, molecular tests or serological tests and control measures must be taken such as the identification of cases, animal segregation, epidemiological study of the infection source of herd and the constant cleanliness and hygiene of the confined environment, equipment and milking utensils. Mastitis cases caused by this pathogen are of great relevance to public health because the ingestion of contaminated and/or derived from milk may trigger the transfer of MRS for human. Thus, a constant warning is required on the epidemiological surveillance in dairy farms.(AU)

Multidrug-resistant Staphylococcus pseudintermedius isolated from dog: case report / Staphylococcus pseudintermedius multirresistente isolado do cão: relato de caso

The zoonotic potential of multidrug resistant (MDR) bacteria is a worldwide concern and companion animals have been implicated in the spread of resistant bacteria. Therefore, surveillance is important, as there are reports of transmission of these bacteria from dog to men, as well as from men to dog. A 5-year-old mixed-breed male dog was admitted with obstructive struvite urolithiasis relapsing for over 18 months, in Botucatu, in the state of São Paulo, Brazil. The strain, biochemically identified as Staphylococcus spp., was MDR and was treated off-label with vancomycin, which resulted in clinical cure. The strain was molecularly identified as Staphylococcus pseudintermedius and the mecA gene was identified. This is the main gene responsible for methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP), which is often resistant to multiple antimicrobials. The hypotheses for this clinical case are the transmission from man to animal, since the tutor was an intensivist doctor, or the bacterium itself could be part of the animal's microbiota and due to other factors, such as stress or obstructive urinary disease, opened a doorway to infection by S. pseudintermedius. Further studies should elucidate the transmission of MDR bacteria between human and pets.(AU)

O potencial zoonótico de bactérias multirresistentes é uma preocupação global e os animais de companhia têm sido implicados na disseminação de bactérias resistentes; assim, é importante a vigilância, pois já existem relatos de transmissão destas bactérias do cão para o homem e vice-versa. Um cão, sem raça definida e de cinco anos de idade, foi atendido na cidade de Botucatu, São Paulo, Brasil, apresentando urolitíase obstrutiva de estruvita recorrente há um ano e meio. Na urocultura do animal foi isolada uma estirpe de Staphylococcus spp. multirresistente; o tratamento com vancomicina possibilitou acura clínica. A estirpe de Staphylococcus spp. isolada foi identificada molecularmente como S. pseudintermedius e nela foi identificada a presença do gene mecA, o principal responsável por S. pseuidintermedius resistente à meticilina (MRSP), e que é frequentemente resistente à múltiplos antimicrobianos. As hipóteses para este caso clínico são a transmissão do homem para o animal, pois o tutor era um médico intensivista, ou que a própria bactéria fazia parte da microbiota do animal e, devido a outros fatores como estresse e doença urinária obstrutiva, abriu-se uma porta de entrada para a infecção pelo S. pseudintermedius. Mais estudos são necessários para a elucidação da transmissão de bactérias multirresistentes entre animais de companhia e o ser humano.(AU)

Atividade antimicrobiana do oleorresina de copaíba (Copaifera reticulata) frente a Staphylococcus coagulase positiva isolados de casos de otite em cães / Antimicrobial activity of copaiba oil (Copaifera reticulata) against coagulase positive Staphylococcus of canine otitis

The aim of this study was to investigate the antimicrobial activity of the oleoresin Copaifera reticulata Ducke against Staphylococcus coagulase positive (SCP) isolated from otitis externa in dogs. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of the oleoresin were determined by broth microdilution method. In addition, we verified the antimicrobial susceptibility profile of the isolates of SCP by agar diffusion method. Eight classes of antimicrobial were used to calculate the multidrug resistance. The chemical composition of the oleoresin was performed by gas chromatography coupled to the mass spectrometry (GC/MS), and β-caryophyllene, β-bisabolene, and (E)-α-bergamotene were the main compounds found. The copaiba oleoresin showed a MIC90 of 0.164mg/mL and a CBM90 of 1.3mg/mL. The multidrug resistance was found in 27% of the strains tested. The results suggest that copaiba oleoresin has bacteriostatic and bactericidal activity even in multidrug-resistant coagulase-positive strains.

O objetivo do presente trabalho foi investigar o potencial antimicrobiano do oleorresina de Copaifera reticulata Ducke em isolados de Staphylococcus coagulase positiva (SCP) provenientes de casos de otite externa em cães. O método de microdiluição em caldo foi utilizado para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) de oleorresina de copaíba. Em adição, foi determinado o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos dos isolados de SCP pelo método de difusão em ágar. Oito classes de antimicrobianos foram usadas para o cálculo de multirresistência antimicrobiana. A determinação da composição química do oleorresina de copaíba foi realizada por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC/MS), sendo que β-cariofileno, β-bisaboleno e (E)-α-bergamoteno foram os compostos majoritários. O oleorresina de copaíba demonstrou CIM90 de 0,164mg/mL e CBM90 de 1,31mg/mL. A multirresistência foi verificada em 27% das cepas testadas. Os resultados sugerem que o oleorresina de copaíba exerceu atividade bacteriostática e bactericida mesmo em cepas multirresistentes de Staphylococcus coagulase-positiva.

Espondilodiscite atípica / Atypical Spondylodiscitis / Espondilodiscitis atípica

As infecções por Staphylococcus coagulase-negativo correspondem a uma pequena percentagem do total das espondilodiscites piogênicas, estando associados a estados imunocomprometidos. Apresentamos o caso clínico de um homem de 58 anos, com uma espondilodiscite L1-L2, por um micro-organismo bastante atípico, o S. hominis. A resolução da patologia só foi possível após duas cirurgias e terapia com antibióticos específicos.

Infections with coagulase-negative Staphylococcus correspond to a small percentage of the total pyogenic spondylodiscitis and are associated with immunocompromised conditions. We present a case of a 58 year old male with a L1-L2 spondylodiscitis by a very atypical microorganism, the S. hominis. Only after two surgeries and specific antibiotic therapy it was possible to eliminate the disease.

Las infecciones por Staphylococcus coagulasa-negativa corresponden a un pequeño porcentaje del total de las espondilodiscitis piogénicas, estando vinculadas a estados inmunocomprometidos. Presentamos el caso clínico de un hombre, de 58 años de edad, con una espondilodiscitis L1-L2, por un microorganismo muy atípico, el S. hominis. La solución de la patología fue posible solamente después de dos cirugías y de terapia con antibióticos específicos.

Avaliação da resistência a antibióticos beta-lactâmicos em isolados de Staphylococcus spp / Evaluation of beta-lactam antibiotic resistance in isolates of Staphylococcus spp

O uso indiscriminado de antibiótico favorece o surgimento de cepas de Staphylococcus spp. resistentes à oxacilina. O mecanismo dessa resistência é devido à produção da proteína PBP2a, codificada pelo gene mecA. Alguns isolados clínicos apresentam o gene mecA, porém são sensíveis a concentrações de oxacilina e cefoxitina, ou seja, nesses isolados, denominados pré-MRS ou OSMRS, a presença do mecA não está associada à sua expressão. Acredita-se que, ao sofrerem pressão seletiva pelo uso indiscriminado de antibióticos, isolados pré-MRS podem tornar-se resistentes. O objetivo desse trabalho foi determinar se o surgimento de cepas de Staphylococcus resistentes à oxacilina e cefoxitina ocorre devido ao estímulo da expressão da PBP2a (indução) ou por seleção antibiótica de linhagens resistentes. Para isso, foram analisadas 42 isolados de Staphylococcus spp., vinte e cinco Staphylococcus aureus e 17 Staphylococcus Coagulase Negativa (SCN) de um Hospital Universitário de Recife-PE. Antes da exposição ao antibiótico a Concentração Inibitória Mínima (MIC) dos isolados foi determinada, o reconhecimento da PBP2a foi avaliado pelos testes de Western blot e Imunofluorescência Indireta (IFI) e realizadas provas de indução de resistência e de seleção por uso de antibiótico. O Western blot e a IFI mostraram que em algumas amostras havia expressão da PBP2a mesmo na ausência do antibiótico. No teste de indução com oxacilina houve uma estabilização do MIC e os isolados não alcançaram o MIC de resistência sugerindo um mecanismo de seleção. No teste para confirmação do processo de seleção, foi observada variabilidade entre as colônias de um mesmo isolado caracterizando um perfil de heteroresistência, enquanto alguns isolados se mostraram homogêneos, com alto nível de resistência. Esses achados reforçam a importância da detecção do gene mecA e da proteína PBP2a para conduta de prescrição de antibióticos na prática clínica.

Immunosuppression by T regulatory cells in cows infected with Staphylococcal superantigen

Our recent study has provided that the in vitro SEC-induced proliferation of bovine T cells is preceded by a period of a non-proliferative immunoregulation of T cells that may be associated with cytokine production regulated by type 1 or type 2 T cells. Inversion of CD4+:CD8+ T cell ratio and induction of CD8+T cells with immunoregulatory activity could increase the probability of intracellular survival of Staphylococcus aureus (S. aureus). The increase of activated CD8+(ACT2+ BoCD8+) T cells in cows with mastitis caused by S. aureus may be associated with immune-regulatory function in the bovine mammary gland. The difference and similarity between bovine activated CD8+ T cells (CD8+ CD26+)and well-established human CD4+ CD25+ T regulatory (Tr)cells may help to reveal their unique immune regulatory system in the host infected with S. aureus.

T cell-related memory

Immunological memory is embodied in the rapid and enhanced immune responsiveness to antigens that have been previously encountered. In this work we have analyzed the development of humoral immunological memory to a conventional antigen (TNP-BSA) and a superantigen (staphylococcal enterotoxin B (SEB) in T cell-reconstituted athymic or euthymic mice. It was demonstrated that T cell reconstituded athymic mice, which lack recent thymic emigrants, mount a primary response to a T cell dependent antigen, but do not develop memory or the capacity to produce specific anti-TNP IgG1 antibodies during the secondary immune response. On the other hand, if thymocytes were continously provided during the secondary response a typical memory response was achieved, with the presence of high levels of specific IgG1. In addition, we have shown that immunization of mice with staphylococcal enterotoxin B (SEB) resulted in a detectable anti-SEB antibody response, which was further increased upon boosting. The typical secondary response do SEB was mainly composed of IgG1, thus suggesting the involvement of interleukin-4 (IL-4)-producing T cells. These results led us to propose that the development of humoral immunological memory can not be solely explained by the long lifespan of primed T lymphocytes, and a novel dynamic and systemic hypothesis is given to explain memory development.

Factores de riesgo para sepsis en pacientes pediátricos con infección por Staphylococcus coagulasa negativa / Sepsis risk factor in pediatrics patients with coagulase negative Staphylococcus infection

Las infecciones por Staphylococcus coagulasa-negativa (SCN) se han descrito con mayor frecuencia en recién nacidos y adultos inmunocomprometidos. Se realizó un estudio de casos y controles para identificar los posibles factores de riesgo para el desarrollo de sepsis por SCN. Se investigaron los siguientes factores: edad, sexo. estancia hospitalaria, catéteres intravasculares, tratamiento antimicrobiano previo, estado nutricional, inmunosupresión y enfermedades subyacentes. Se incluyeron 40 pacientes, de 7 días a 14 años; 24 con sepsis (casos) y 24 con bacteriemia (controles). Los factores de riesgo más importantes, con diferencia estadísticamente significativa fueron: catéteres intravasculares (central P=0.0018 y periférico P<0.001), cánula endotraqueal (P=0.006), sondas (P<0.001), estancia hospitalaria prolongada (P=0.00639) y nebulizadores (P=0.012). Cualquier paciente en la edad pediátrica expuesto a los factores de riesgo mencionados puede desarrollar infección grave por SCN

Anticuerpos antimicroorganismos comunes en niños de diferentes edades / Microorganism antibodies common in children of ages different

Este trabajo tuvo por objeto investigar cualitativa y semicualitativamente Ac. contra una variedad de MO comunes: Pr; EC; Stp; Str; Kl y Ps en niños sanos, de clase social media alta, de la ciudad de Río Cuarto, Provincia de Córdoba (Argentina) y comparar sus títulos en relación a la edad. Para investigar los ac se utilizó la técnica de Inmunofluorescencia indirecta. De acuerdo con la edad de los niños se conforman cuatro Grupos. Los Ac. Anti: Pr, Kl y Ps fueron observados en una cantidad significativamente menor de niños en el Grupo I. La tendencia a encontrar estos Ac, en un número mayor de casos, está desplazada hacia los Grupos II, III y IV (niños mayores). La frecuencia de casos en la que se halló Ac. Anti: EC, Stp, Str fue similar en todos los grupos. Los Ac. antibacterianos, generalmente, estaban en concentraciones mayores (títulos más altos) en los Grupos II,III y IV. En nuestra causística se hallaron Ac. con especificidad y niveles definidos, con las variaciones cuali y cuantitativas que se demuestran. Estos hallazgos podrían atribuirse a la forma particular de respuestas de anticuerpos, inducidas por los MO que, sin duda, son influenciados por los hábitos personales, el ambiente y la edad de las personas. El estudio de los distintos Ac. contra MO resulta de interés en la mejor comprensión de la inmunidad individual y/o colectiva.

Inmunoensayo enzimático (ELISA) para la detección de enterotoxinas B y C de S. aureus en leche / Enzimatic inmunoessay for the detection of entrotoxins B and C of S. aureus in milk

Se utilizaron las cepas 243 y6 361 de S. aureus para la obtención de las enterotoxinas B y C. Se estandarizó la técnica inmunoenzimática cualitativa y cuantitativamente. Se contaminaron artificialmente leches y las enterotoxinas fueron determinadas del extracto demostrándose su presencia al nivel de nanogramos. Esta técnica inmunoenzimática ELISA implementada poor nosostros con las condiciones operativas de nuestro medio, resultó de fácil manejo, corto tiempo de elaboración, bajo costo y con una gran sensibilidad diagnóstica

Staphylococcus aureus enterotoxins B and C, were obtained from strains 243 and 361 respectively. An immunoenzimatic technique was standariced both quantitative and qualitativly. We were able to detect enterotoxin to nanogram level on extracts from artificially contaminated milk. This ELISA immunoenzimatic technique implemented by us under the operative conditions of our working environment, resulted to be easy to handle, consumes only a short time, has a low cost and great diagnostic sensitivity.

Chronic bronchitis. IV--Antibody titres to bacterial antigens during acute exacerbations.

In 49 patients of chronic bronchitis with acute exacerbation, serum antibody titres were estimated against the respective pathogen isolated and cultured from sputum of individual patients. Antibody titres to Klebsiella and Staphylococcus coagulase positive organisms were found in 28 and 25 patients respectively. Paired serum samples from 21 patients showed rising antibody titres in 17 of them, whereas the antibody titres fell in the remaining 4 patients. Notably, only 2 patients demonstrated a four fold rise or fall in the antibody titres. The significance of these findings is discussed.

Reactividad cutánea a antígenos bacterianos durante el primer año de vida / Cutaneous reactivity to bacterial antigens during the first of life

Se exploró la reactividad cutánea a 100 niños, desde su nacimiento hasta el año de edad, en 3 momentos, recién nacidos, a los 6 meses y al año de edad, con antígenos de staphylococcus albus y Escherichia coli. Los antígenos fueron introducidos por inyección intradémica y la lectura de los resultados se realizó a los 20 minutos (reacción inmediata), 6 horas (reacción rápida) y 48 horas (reacción retardada). Se obtuvo respuestas correlativas al desarrollo del sistema inmunitario en el niño y la historia familiar de enfermedad alérgicas. En este trabajo se pone de manifiesto el desarrollo de la llamada alergia bacteriana y abre una puerta de carácter científico para el uso de las vacunas bacterianas